Микробиологическая лаборатория чем занимается
Бактериологическая лаборатория
Содержание
Общие сведения
Бактериологические лаборатории как самостоятельные структурные единицы организуются при санитарно-эпидемиологических станциях (СЭС), в инфекционных больницах, больницах общего типа, некоторых специализированных стационарах (например, в туберкулёзных, ревматологических, кожно-венерологических) и в поликлиниках.
Бактериологические лаборатории при СЭС исследуют на общую бактериальную загрязнённость, а также на заражённость условно патогенной и патогенной микрофлорой объекты внешней среды: воздух, воду, почву продукты питания; проводят обследование организованных коллективов и отдельных лиц на носительство патогенных бактерий кишечной группы, коринебактерий дифтерии, коклюша, паракоклюша, менингококка. Работа микробиологической лаборатории в комплексе с другими отделами СЭС имеет определённую задачу — оздоровление окружающей среды и снижение заболеваемости населения.
Бактериологические лаборатории при лечебно-профилактических учреждениях выполняют анализы, необходимые для постановки и уточнения диагноза инфекционного заболевания, способствуя правильному выбору специфического лечения и определению сроков выписки больного из инфекционной больницы. Предметом для исследования в бактериологических лабораториях являются:
Помещение бактериологической лаборатории и оборудование рабочего места
Специфика микробиологических работ требует, чтобы помещение, отведённое под лабораторию, было изолировано от больничных палат, жилых комнат, пищевых блоков. В состав бактериологической лаборатории входят: лабораторные комнаты для бактериологических исследований и подсобные помещения; автоклавная или стерилизационная для обеззараживания отработанного материала и заражённой посуды; моечная, оборудованная для мытья посуды; средоварочная для приготовления, розлива, стерилизации и хранения питательных сред; виварий для содержания подопытных животных; материальная для хранения запасных реактивов, посуды, аппаратуры и хозяйственного инвентаря.
Перечисленные подсобные помещения как самостоятельные структурные единицы входят в состав крупных бактериологических лабораторий. В небольших лабораториях средоварочную и стерилизационную объединяют в одной комнате; специальное помещение для содержания подопытных животных отсутствует.
Под лабораторные комнаты, в которых производят все бактериологические исследование, отводят наиболее светлые, просторные помещения. Стены в этих комнатах на высоту 170 см от пола окрашивают в светлые тона масляной краской. Пол покрывают релином или линолеумом. Такого рода отделка позволяет пользоваться при уборке помещения дезинфицирующими растворами.
В каждой комнате должна быть раковина с водопроводной подводкой и полкой для бутыли с дезинфицирующим раствором.
В одной из комнат оборудуют застеклённый бокс с предбоксником для выполнения работ в асептических условиях. В боксе ставят стол для произведения посевов, табурет, над рабочим местом монтируют бактерицидные лампы. В предбоксник помещают шкаф для хранения стерильного материала. Лабораторное помещение оборудуется столами лабораторного типа, шкафами и полками для хранения необходимой при работе аппаратуры, посуды, красок, реактивов.
Очень большое значение для работы имеет правильная организация рабочего места врача — бактериолога и лаборанта. Лабораторные столы устанавливают около окон. При размещении их нужно стремиться к тому, чтобы свет падал спереди или сбоку от работающего, лучше с левой стороны, но ни в коем случае не сзади. Желательно, чтобы комнаты для проведения анализов, особенно для микроскопирования, имели ориентацию окон на север или северо-запад, так как для работы необходим равный рассеянный свет. Освещённость поверхности столов для работы должна быть 500 лк. Для удобства дезинфекции поверхность лабораторных столов покрывают пластиком, а каждое рабочее место на нём — зеркальным стеклом.
За каждым сотрудником лаборатории закрепляют отдельное рабочее место площадью 150×60 см. Все рабочие места оборудуют предметами, необходимыми для повседневной работы.
Правила работы и поведения в лаборатории
Особенностью бактериологических работ является постоянное соприкосновение сотрудников лаборатории с заразным материалом, культурами патогенных микробов, заражёнными животными, кровью и выделениями больного. Поэтому все сотрудники бактериологической лаборатории обязаны соблюдать следующие правила работы, которые обеспечивают стерильность в работе и предупреждают возможность возникновения внутрилабораторных заражений:
Уборка лабораторного помещения
Микробиологическую лабораторию необходимо содержать в чистоте. Следует регулярно проводить гигиеническую уборку помещений лаборатории. Обеспечить полную стерильность лаборатории очень трудно и это не всегда необходимо, но значительно снизить количество микроорганизмов в воздухе и на различных поверхностях в лабораторных помещениях возможно. Это достигается путём применения на практике методов дезинфекции, то есть уничтожения возбудителей инфекционных болезней на объектах внешней среды.
Пол, стены и мебель в микробиологической лаборатории обрабатывают пылесосом и протирают различными дезинфицирующими растворами. Обработка пылесосом обеспечивает освобождение предметов от пыли и удаление с них значительного количества микроорганизмов. Установлено, что при 4-кратном проведении щёткой пылесоса по поверхности предмета с него удаляется примерно 47 % микроорганизмов, а при 12-кратном — до 97 %. В качестве дезинфицирующих растворов чаще всего применяют 2-3%-ным раствором соды (бикарбонат натрия) или лизола (препарат фенола с добавлением зелёного мыла), 0,5-3%-ным водным раствором хлорамина и некоторыми другими дезинфектантами.
Воздух в лаборатории наиболее просто дезинфицировать проветриванием. Продолжительная вентиляция помещения через форточку (не менее 30-60 минут) приводит к резкому снижению количества микроорганизмов в воздухе, особенно при значительной разнице в температуре между наружным воздухом и воздухом помещения. Более эффективный и наиболее часто применяемый способ дезинфекции воздуха — облучение УФ-лучами с длиной волны от 200 до 400 нм. Эти лучи обладают высокой антимикробной активностью и могут вызывать гибель не только вегетативных клеток, но и спор микроорганизмов.
Лекция 2 Микробиологическая лаборатория
Просмотр содержимого документа
«Лекция 2 Микробиологическая лаборатория»
Микробиологическая лаборатория – это специализированная профессиональная организация, ориентированная на осуществление исследовательских лабораторных работ
В зависимости от выполняемых исследований микробиологические лаборатории подразделяют на:
ГРУППЫ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПО СТЕПЕНИ ОПАСНОСТИ
ЛАБОРАТОРИИ РАЗНЫХ ГРУПП РИСКА
В зависимости от уровня безопасности работы с микроорганизмами лаборатории подразделяют на четыре группы риска.
Большая часть лабораторий работает с III и IV группами, а изучением возбудителей особо опасных инфекций (группы I и II) занимаются только специализированные лаборатории.
Требования к организации лаборатории групп опасности III и IV
1. Лаборатории должны располагаться в отдельном здании или в изолированной части здания.
2. Должны иметь два выхода: один для сотрудников, другой — для доставки материала для исследований.
3. Лаборатории должны иметь необходимый набор помещений.
4. В помещениях должны быть водопровод, электричество, отопление и вентиляция. В системе водоснабжения должна быть раздельная подачи воды для лабораторных и бытовых нужд (сеть питьевой воды).
5. Вентиляция должна быть приточно-вытяжной. При необходимости вентиляцию следует оснастить фильтрами тонкой очистки воздуха.
6. Помещения должны иметь естественное и искусственное освещение.
Устройство микробиологической лаборатории
Каждая лаборатория должна иметь «чистую» и «грязную» зоны.
«Грязная» («заразная») зона включает:
Окна и двери всех помещений должны герметично закрываться. Вентиляция должна быть оборудована фильтрами. Помещения должны быть оборудованы бактерицидными лампами. Обязательна маркировка автоклавов, столов, стеллажей для чистого и инфицированного материала. Покрытие лабораторной мебели, поверхности пола, стен и потолка должны быть гладкими и устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих средств.
«Чистая» зона включает:
Отходы микробиологической лаборатории подлежат обязательному обеззараживанию и удалению
Не токсичны, не имели контакта с биологическими жидкостями пациентов.
Эпидемически особо опасные.
Биологические отходы вивариев.
Отходы туберкулезного, микологического, микробиологического отделения.
Отходы загрязненные кровью, выделениями.
Методы исследований в микробиологии
микроскопический — изучение строения микробов с использованием специальной микроскопической техники (микроскопов).
бактериологический (культуральный) — посев микроорганизмов на питательные среды для получение чистых культур микробов и изучение их свойств. Этот метод позволяет. определить, вида микроорганизма.
серологический — выявление антител к возбудителям в биологических жидкостях больного (чаще в крови). Позволяет быстро определить вид микроорганизма.
аллергологический — оценка аллергических реакций, возникающих у человека, после введения в организм компонентов или цельных клеток микроба-возбудителя.
биологический — заражение лабораторных животных или куриных эмбрионов.
молекулярно-биологический — изучение состава микробных нуклеиновых кислот с помошью полимеразной цепной реакции (ПЦР), сиквенирования и гибридизации ДНК.
Микробиологические лаборатории и их оборудования
Все микробиологические, биохимические и моле-кулярно-биологические исследования микроорганизмов проводят в специальных лабораториях, структура и оборудование которых зависят от объектов исследования (бактерий, вирусов, грибов, простейших), а также от их целевой направленности (научные исследования, диагностика заболеваний). Изучение иммунного ответа и серодиагностика заболеваний человека и животных осуществляют в иммунологических и серологических (serum — сыворотка крови) лабораториях.
Бактериологические, вирусологические, микологические и серологические (иммунологические) лаборатории входят в состав санитарно-эпидемиологических станций (СЭС), диагностических центров и крупных больниц. В лабораториях СЭС выполняют бактериологические, вирусологические и серологические анализы материалов, полученных от больных и контактировавших с ними лиц, обследуют бактерионосителей и проводят санитарно-микробиологические исследования воды, воздуха, почвы, пищевых продуктов и т.д.
В бактериологических и серологических лабораториях больниц и диагностических центров проводят исследования с целью диагностики кишечных, гнойных, респираторных и других инфекционных заболеваний, осуществляют микробиологический контроль за стерилизацией и дезинфекцией.
Диагностику особо опасных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва и др.) проводят в специальных режимных лабораториях, организация и порядок деятельности которых строго регламентированы.
В вирусологических лабораториях диагностируют заболевания, вызванные вирусами (грипп, гепатит, полиомиелит и др.), некоторыми бактериями — хламидиями (орнитоз и др.) и риккетсиями (сыпной тиф, Ку-лихорадка и др.). При организации и оборудовании вирусологических лабораторий учитывают специфику работы с вирусами, культурами клеток и куриными эмбрионами, требующую строжайшей асептики.
В микологических лабораториях проводят диагностику заболеваний, вызываемых патогенными грибами, возбудителями микозов.
Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещениях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением.
В каждой лаборатории предусмотрены:
а) боксы для работы с отдельными группами возбудителей;
б) помещения для серологических исследований;
в) помещения для мойки и стерилизации посуды, приготов
ления питательных сред;
г) виварий с боксами для здоровых и подопытных живот
ных;
д) регистратура для приема и выдачи анализов.
Наряду с этими помещениями в вирусологических лабораториях имеются боксы для специальной обработки исследуемого материала и работы с культурами клеток
Оборудование микробиологических лабораторий
Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов.
1. Приборы для микроскопии: биологический иммерсионный микроскоп с дополнительными приспособлениями (осветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный конденсор и др.), люминесцентный микроскоп.
2. Термостаты и холодильники.
3. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и т.д.: аппарат для получения дистиллированной воды (дистиллятор), технические и аналитические весы, рН-метры, аппаратура для фильтрования, водяные бани, центрифуги.
4. Набор инструментов для манипуляций с микробами: бактериологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.
5. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри, матрацы, флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки и др., аппарат для изготовления ватно-марлевых пробок.
Крупные диагностические комплексы имеют автоматические анализаторы и компьютеризированную систему оценки полученной информации.
В лаборатории выделено место для окраски микроскопических препаратов, где находятся растворы специальных красителей, спирт, кислоты, фильтровальная бумага и др. Каждое рабочее место снабжено газовой горелкой или спиртовкой и емкостью с дезинфицирующим раствором. Для повседневной работы лаборатория должна располагать необходимыми питательными средами, химическими реактивами, диагностическими препаратами и другими материалами.
В крупных лабораториях имеются термостатные комнаты для массового выращивания микроорганизмов, постановки серологических реакций. Для выращивания, хранения культур, стерилизации лабораторной посуды и других целей используют следующую аппаратуру.
1. Термостат. Аппарат, в котором поддерживается постоянная температура. Оптимальная температура для размножения большинства патогенных микроорганизмов 37 «С. Термостаты бывают воздушными и водяными.
2. Микроанаэростат. Аппарат для выращивания микроорганизмов в анаэробных условиях.
4. Холодильники. Используют в микробиологических лабораториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, крови, вакцин, сывороток и прочих биологически активных препаратов при температуре около 4 °С. Для хранения препаратов при температуре ниже О °С применяют низкотемпературные холодильники, в которых поддерживается температура —20 °С или —75 «С.
5. Центрифуги. Применяют для осаждения микроорганизмов, эритроцитов и других клеток, для разделения неоднородных жидкостей (эмульсии, суспензии). В лабораториях используют центрифуги с различными режимами работы.
6. Сушилъно-стерилизационный шкаф (печь Пастера). Предназначен для суховоздушной стерилизации стеклянной лабораторной посуды и других жаростойких материалов.
7. Стерилизатор паровой (автоклав). Предназначен для стерилизации перегретым водяным паром (под давлением). В микробиологических лабораториях используют автоклавы разных моделей (вертикальные, горизонтальные, стационарные, переносные).
Виды микробиологических лабораторий и их специфика
В медицинских микробиологических лабораториях исследуют различные патогенные для человеческого организма микроорганизмы.
По типу выполняемых исследований лаборатории делятся на диагностические, производственные и научно-исследовательские.
По типу исследуемых микроорганизмов, лаборатории могут быть бактериологическими, вирусологическими, микологическими и протозоологическими.
Для работы в таких учреждениях могут быть допущены только квалифицированные специалисты, а условия исследований должны обеспечивать безопасность персонала, а также невозможность утечки патогенной флоры за пределы лаборатории.
Группы возбудителей
Они делятся на 4 группы:
Лаборатории по группам риска
По этому параметру лаборатории делятся на такие виды:
Бактериологические лаборатории по виду выполняемых функций делятся на объекты:
Требования к лабораториям высоких групп опасности (III и IV)
Лаборатории высокой опасности должны быть размещены в отдельном здании. При планировке должны быть обеспечены два выхода – для персонала и доставки биологического материала. Лаборатории, расположенные в вузах, а также лаборатории в НИИ и на предприятиях по производству медпрепаратов могут иметь только один выход.
В зависимости от производственной мощности рассчитывается количество необходимых помещений. Для каждого помещения разрабатывается набор необходимых инженерных коммуникаций, обеспечивающих эффективность и удобство работы персонала. В каждой лаборатории должны быть предусмотрены чистые и грязные зоны.
Каждая из этих зон имеет свои особенности:
Правила проведения исследований в лабораториях
Перед заходом в грязную зону и работы в ней, обязательно проводится проверка качества посуды, приспособлений, инструмента. Применяемые в работе приспособления одноразового типа должны находиться в закрытых герметичных упаковках. Недопустимо оставлять рабочее место без надзора до завершения цикла исследований. Дети или домашние животные ни в коем случае не допускаются в эту зону.
После окончания работ все биологические материалы, которые исследовались, должны быть убраны в специализированные хранилища. Остатки материала на используемой посуде или инструменте не вытирается самостоятельно, а собирается и передается для обработки в автоклаве. Сливать отходы в канализацию категорически запрещено. По окончании работ обязательно проводится обработка рук санитарно-гигиеническими средствами.
Часть I. Общая микробиология
Микробиологические лаборатории организуются при больницах, поликлиниках и санитарно-эпидемиологических станциях (СЭС).
Материалом для микробиологических исследований служат чаще всего выделения человека (испражнения, моча, рвотные массы, мокрота, отделяемое ран), а также кровь, желчь, спинномозговая жидкость, промывные воды желудка, бронхов, трупный (секционный) материал и др.
Работа в микробиологической лаборатории с заразным материалом делает обязательным размещение ее в изолированном помещении. Для выполнения всех правил работы с заразным материалом и проведения микробиологических исследований лаборатория должна иметь несколько помещений:
Число лабораторных комнат определяется объемом работы лаборатории. В крупных лабораториях выделяют отдельные комнаты для работы с различными видами возбудителей.
Рабочий стол устанавливают у окна, чтобы свет падал сбоку или прямо. На столе размещают горелку, бактериологические петли, банки с дезинфицирующим раствором и ватой.
Внимание! Перед началом работы на столе размещают все необходимое для проведения исследования. Горелку устанавливают на расстоянии, равном предплечью работающего, т. е. в позиции, исключающей лишние движения во время работы. Размер пламени в горелке и правильное свечение регулируют до начала работы.
В термостате при проведении обычных исследований температура должна быть 37° С. В больших лабораториях может быть оборудована специальная термальная комната. Температуру ежедневно региструют.
В холодильнике держат некоторые питательные среды, диагностические препараты, кровь, желчь и пр.
Центрифугу используют для отделения плотных частиц от жидкости (например, эритроцитов от сыворотки).
В шкафах держат штативы, посуду, сухие питательные среды, реактивы и т. п.
Около раковины должны находиться сосуд с дезинфицирующим раствором для обработки рук и аптечка с набором предметов для оказания первой медицинской помощи.
Внимание! В боксе не разговаривают и избегают лишних движений.
Помещение для приготовления питательных сред должно находиться рядом с моечной и стерилизационной. В этой комнате должна быть раковина с подводкой горячей и холодной воды, дистиллятор, плита (газовая или электрическая), шкафы или стеллажи для хранения сухих питательных сред, химических реактивов, стерильной посуды.
В стерилизационной находятся приборы для стерилизации чистой посуды, питательных сред и обеззараживания отработанного материала: автоклавы, сушильный шкаф и др. (см. главу 5).
При наличии отдельной препараторской комнаты ее используют для подготовки, упаковки посуды и другой подсобной работы.
В регистратуре, или части помещения ее заменяющей, принимают и регистрируют материал, поступающий для исследования, и выдают заключения микробиологического исследования.
Правила поведения и работы в микробиологической лаборатории
1. К работе допускают сотрудников только после ознакомления с правилами поведения и режимом работы.
2. Все работники подвергаются профилактическим прививкам, главным образом против кишечных инфекций.
3. Каждый сотрудник имеет халат и шапочку; в лаборатории носят сменную обувь.
4. Каждый сотрудник обязан строго соблюдать личную гигиену, содержать в чистоте рабочее место.
5. Поступающий в лабораторию материал регистрируют в специальный журнал и маркируют.
6. Весь поступающий материал для исследования считают инфицированным (заразным). Его ставят на специальный поднос, а емкость с материалом протирают дезинфицирующим раствором снаружи.
7. Переливать исследуемый материал из одной емкости в другую следует над дезинфицирующим раствором. Жидкий материал отсасывают с помощью резинового баллона, надетого на пипетку.
8. При попадании исследуемого материала на руки, стол или другие предметы их обрабатывают дезинфицирующим раствором.
9. По окончании работы руки, инструменты, рабочее место обрабатывают дезинфицирующим раствором. Культуры обезвреживают или, при необходимости, сохраняют в холодильнике, который опечатывают. Материал, требующий продолжения исследования, ставят в термостат, который тоже опечатывают. При хранении патогенных культур в лаборатории их регистрируют в специальном журнале. Указывают количество культур, даты их поступления, пересева, уничтожения.
10. В лаборатории категорически запрещается принимать пищу и курить.
11. В лаборатории ежедневно проводят влажную уборку помещений с применением дезинфицирующих растворов. Еженедельно моют стены, полы, инвентарь горячей водой с мылом. Бокс убирают в конце рабочего дня, а перед работой облучают бактерицидными лампами.
Режим работы в лабораториях зависит от степени опасности заражения для лиц, работающих с болезнетворными микроорганизмами или материалом, их содержащим.
Микроорганизмы по степени опасности заражения ими разделены на четыре группы:
I. Возбудители чумы.
II. Возбудители высококонтагиозных эпидемических заболеваний (холера, бруцеллез, туляремия, сибирская язва, сап, мелиоидоз, лептоспироз).
III. Возбудители эпидемических бактериальных инфекций: кишечных (брюшной тиф, паратифы А и В, дизентерия), туберкулеза, дифтерии, коклюша, менингита, гонореи, листериоза, трахомы, лепры; патогенные анаэробы, спирохеты (возбудители эпидемического возвратного тифа и сифилиса) и др.
IV. Сальмонеллы, протей, эшерихии, клебсиеллы, гемоглобинофильные бактерии, стафилококки, стрептококки, возбудители газовой гангрены и др.
Большое значение для микробиологического исследования имеет техника взятия исследуемого материала и способ доставки его в лабораторию. Любой материал должен быть собран в стерильную посуду с соблюдением условий, предохраняющих его от загрязнения посторонней микрофлорой.
Испражнения берут специальной ректальной петлей, которую вводят в прямую кишку на 8-15 см. Петлю помещают в пробирку с консервантом (глицериновая смесь, фосфатно-буферная смесь и т. п.). Можно также использовать стерильные картонные тарелки или судно, обработанное дезинфицирующим раствором (10% хлорная известь) и тщательно промытое горячей водой для удаления следов хлорной извести.
Мочу берут стерильным катетером в стерильные флаконы или пробирки.
Гнойное отделяемое из раны, мазки из зева и носа берут стерильными ватными тампонами и помещают в стерильные пробирки. Рвотные массы собирают в стерильную широкогорлую банку, закрытую вощаной бумагой.
Трупный (секционный) материал следует брать в первые часы после смерти больного, так как микрофлора кишечника очень быстро распространяется по всему организму. Кровь из сердца берут стерильным шприцем, стерильными ножницами вырезают кусочки печени, селезенки и других органов. Все пробы для микробиологического исследования помещают в стерильные сосуды.
На пробирку, банку, флаконы с материалом для исследования наклеивают этикетку, на которой указаны фамилия, имя, отчество, возраст больного и дата взятия материала. В направлении повторяют сведения, приведенные на этикетке, и дополнительно сообщают: характер материала, учреждение, направившее материал, клинический диагноз, цель исследования и фамилию врача, направляющего материал.
Доставку исследуемого материала в лабораторию производят в кратчайший срок в специальных металлических биксах, контейнерах, пеналах. Материал, содержащий микроорганизмы, малоустойчивые во внешней среде, переносят в специальных сосудах, в которых поддерживается температура 37° С, при доставке вирусного материала используют термосы со льдом для создания низкой температуры.
Внимание! Правильный сбор и транспортировка исследуемого материала обеспечивают эффективность микробиологических исследований.
Методы микробиологического исследования
Микроскопический метод используется для изучения окрашенных мазков и мазков из нативного материала в микроскопе и позволяет характеризовать морфологию (форму) возбудителя, его отношение к различным красителям, подвижность. С помощью этого метода можно подтвердить клинический диагноз гонореи, дифтерии, возвратного тифа, сифилиса и некоторых других болезней.
Микробиологический метод применяют для выделения и изучения чистой культуры возбудителя, т. е. для установления этиологии заболевания. Лабораторная диагностика большинства инфекционных болезней (брюшной тиф, дизентерия, холера, коклюш и др.) основана на применении этого метода.
Контрольные вопросы
1. Каковы задачи микробиологической лаборатории?
2. Какие помещения имеет микробиологическая лаборатория?
3. Как следует вести себя при работе в микробиологической лаборатории?
4. Как собирают и пересылают в лабораторию материал для микробиологического исследования?